3 farm vestn 2023; 74 IZVLEČEK BRAZILSKE KREšE (ACmEl l A ol ERACEA) V POmLAJEVALNI KOZmETIKI: SENZORIČNO VREDNOTENJE TESTNE IN PLACEBO EmULZIJE ExTRACT Of BRAZILIAN CRESS (ACmEl l A ol ERACEA) IN REJUVENATINg COSmETICS: SENSORY EVALUATION Of TEST AND PLACEBO EmULSION AVTORICI / AUTHORS: asist. Katja Schoss, mag. ind. farm. izr. prof. dr. Nina Kočevar Glavač, mag. farm. Univerza v Ljubljani, Fakulteta za farmacijo, Katedra za farmacevtsko biologijo, Aškerčeva 7, 1000 Ljubljana NASLOV ZA DOPISOVANJE / CORRESPONDENCE: E-mail: katja.schoss@ffa.uni-lj.si POVZETEK Izrazite spremembe videza kože, vključno z nastan- kom g ub kot najbolj očitneg a znaka staranja kože, pomembno vplivajo na posameznikovo samoza- vest. Danes imamo zato na voljo pester izbor koz- metičnih izdelkov in poseg ov, ki izboljšajo videz zrele kože, kozmetološka znanost pa se intenzivno ukvarja tudi s kozmetično aktivnimi sestavinami rast- linskeg a izvora na tem področju. V raziskavi smo izdelali placebo in testno emulzijo z izvlečkom bra- zilske kreše (Acmella o leracea). Njuno delovanje smo ovrednotili na prostovoljcih z metodo hedon- skeg a senzoričneg a vrednotenja z efektivnim testi- ranjem, pri čemer smo se osredotočili na vidne učinke zmanjšanja očesnih g ub. Po dvomesečni uporabi emulzije z izvlečkom brazilske kreše se je stanje g ub izboljšalo, vendar učinek ni bil statistično značilen. KLJUČNE BESEDE: Acmella o leracea, anti-ag e učinek, brazilska kreša, kozmetika ABSTRACT Distinct chang es in the appearance of the skin, including the appearance of wrinkles as the most obvious sig n of skin ag eing , have a sig nificant impact on an individual's self-esteem. Thus, we have a wide selection of cosmetic products and procedures on the market today that improve the appearance of mature skin or wrinkles, and cos- metic science also deals intensively with cosmet- ically active ing redients of plant orig in in this area. In the research, we produced a placebo and a test emulsion with an extract of para cress (Acmella o leracea). We evaluated their perfor- mance on volunteers using the method of hedonic sensory evaluation with effective testing , focusing on the visible effects of reducing eye wrinkles. The emulsion with para cress extract showed an improved wrinkle condition after two months of use, however, the effect was not statistically sig - nificant. KEY WORDS: Acmella o leracea, anti-ag e effect, cosmetics, para cress IZVIRNI ZNANSTVENI ČLANKI kožne reakcije, kot so draženje in rdečina kože, kontaktni dermatitis, podplutbe na mestu injiciranja, težave pri izg o- vorjavi, okužbe in otekline tretiranih predelov kože. V koz- metološki znanosti je zato raziskovanje usmerjeno v iskanje in vrednotenje sestavin za aktivno neg o zrele kože, ki izka- zujejo visoko učinkovitost, hkrati pa ne povzročajo nežele- nih kožnih reakcij (2). Ena izmed aktualnih sestavin za uporabo v kozmetičnih izdelkih proti staranju je izvleček brazilske kreše z INCI- imenom Acmella oleracea Extract ali Spilanthes Acmella Extract. Brazilska kreša, Acmella o leracea (L.) R. K. Jan- sen syn. Spilanthes o leracea L. (slika 1), spada v družino nebinovk (Asteraceae) in uspeva v vlažnih in toplih ob- močjih tropskeg a in subtropskeg a pasu ter je pog osta rastlina tropskih g ozdov južne Amerike. Liste in cvetove tradicionalno v prehrani uporabljajo kot začimbo, saj je zaradi ostreg a okusa dober nadomestek pekočih vrst pa- prike. V tradicionalni medicini zunanje dele rastline upo- rabljajo kot anestetik za zdravljenje zobobola in bolečeg a g rla, prav tako pa se pripravkov poslužujejo pri celjenju ran in revmatizmu zaradi protivnetneg a delovanja (3). V znanstvenih raziskavah so podrobneje raziskali antipireti- čno (4), lokalno anestetično (4), protivnetno (5), antioksi- dativno (6, 7), vazorelaksantno (6), diuretično (8), imuno- stimulativno (9) in protimikrobno (10) delovanje izvlečkov brazilske kreše. Učinkovine oz. kozmetično aktivne spojine, prisotne v rast- lini, so lipofilni alkilamidi, natančneje amidi srednjeverižnih polinenasičenih maščobnih kislin, ki so značilni tako za vrsto A. o leracea kot tudi za rod Acmella. gre za v naravi redko prisotne derivate izobutilamina in maščobnih kislin z dvojnimi in trojnimi vezmi, identificirali pa so tudi derivate, 1 Uvo d Koža je naš največji org an, ki opravlja barierno funkcijo za- ščite pred zunanjimi dejavniki (fizikalna bariera med telesom in okoljem, preprečevanje izg ube vode in elektrolitov, za- ščita pred vdorom kemikalij in mikroorg anizmov), termore- g ulacijsko in čutilno (vsebuje senzorične in avtonomne živce ter senzorične receptorje za zaznavanje dražljajev dotika, vibracij, pritiska, temperature, bolečine in srbenja) ter imunsko funkcijo. Po približno 25. letu se na koži za- čnejo pojavljati prvi znaki staranja, ki so posledica intrinzi- čnih (g enetika, bolezni, hormoni, presnovni procesi itd.) ali ekstrinzičnih (UV-žarki, kajenje, temperaturne spremembe, nezdrava prehrana, prekomerno uživanje alkohola itd.) de- javnikov. S staranjem se procesi v koži upočasnijo. Koža se prične tanjšati, nag ubanost bazalne membrane med usnjico (dermis) in povrhnjico (epidermis) se zmanjša, kar povzroči manjšo izmenjavo snovi iz usnjice v celice povrh- njice. Prve vidne spremembe zaradi staranja kože se po- javijo kot drobne linije oz. g ube, navadno okoli oči, zlasti na lateralnem periorbitalnem delu očesa (1). Za izboljšanje videza zrele kože ter za upočasnitev nadalj- njeg a staranja kože pog osto uporabljamo kozmetične iz- delke z vg rajenimi kozmetično aktivnimi sestavinami, kot so alfa-hidroksi kisline, antioksidanti, vlažila, retinoidi in UV- filtri. možna je tudi uporaba bolj invazivnih lepotnih poseg ov, kot so injekcije toksina botulina in polnil (elastina, kolag ena, hialuronske kisline) ter kemični, mehanski ali laserski piling i. Čeprav so ti poseg i učinkoviti, pa lahko povzročijo neželene 4 IZVLEČEK BRAZILSKE KREš E (ACmEl l A ol ERACEA) V POmLAJEVALNI KOZmETIKI: SENZORIČNO VREDNOTENJE TESTNE IN PLACEBO EmULZIJE farm vestn 2023; 74 Slika 1: Acmella oleracea (levo; vir slike: iStock by Getty Images) in spilantol (desno). Figure 1: Acmella oleracea (left; photo: iStock by Getty Images) and spilanthol (right). ki imajo modificiran tako aminski (npr. prisotnost aromat- skeg a obroča) kot maščobni (npr. prisotnost epoksidneg a obroča) strukturni del (10). glavni alkilamid je spilantol (slika 1), ki je odg ovoren za lokalne anestetične in protivnetne učinke rastline (3, 11, 12), deluje pa tudi kot pospeševalec penetracije (13) in skozi kožo dokazano prehaja tudi sam (14). V okviru raziskave smo izdelali emulzijo za kozmetično uporabo z izvlečkom brazilske kreše ter z metodo hedon- skeg a senzoričneg a vrednotenja z efektivnim testiranjem ovrednotili vidne pomlajevalne učinke (izboljšan videz g ub) na lateralnem periorbitalnem delu očesa prostovoljcev v primerjavi s placebo emulzijo brez vg rajeneg a izvlečka. 2 Mat er ial i in Met o de 2.1 SESTAVINE ZA IZDELAVO EmULZIJ Demineralizirana voda (INCI: Aqua), f akulteta za farmacijo; mandljevo olje (INCI: Prunus Amyg dalus Dulcis Oil), Bac- cara Rose, Nemčija; karitejevo maslo (INCI: Butyrosper- mum Parkii Butter), Afrikahandel CSR Projekt, Nemčija; samoemulg irajoči g licerilstearat ali g licerilstearat SE (INCI: glyceryl Stearate SE), Caesar & Lorentz, Nemčija; g licerol (INCI: glycerin), f armalabor, Italija; transparentni ksantan (INCI: xanthan gum), Alexmo Cosmetics, Nemčija; vitamin E (INCI: Tocopherol), Drag onspice, Nemčija; g licerilkaprilat (INCI: glyceryl Caprylate), suhi izvleček brazilske kreše (INCI: Acmella Oleracea Extract), Aliacura, Nemčija; 90 % mlečna kislina (INCI: Lactic Acid), Sig ma-Aldrich, Nemčija; eterično olje sivke (INCI: Lavandula Ang ustifolia Oil), Be- hawe, Nemčija. 2.2 IZDELAVA EmULZIJE Razvoj emulzije (količina posamezneg a vzorca je znašala 50 g ) je obseg al optimizacijo količin g licerilstearata SE (1– 1,3 %), ksantana (0,2–0,4 %) in suheg a izvlečka brazilske kreše (0–2 %), pri čemer smo osnovno fizikalno stabilnost preverjali s centrifug iranjem 30 min pri 3000 rpm/min. Kon- čna sestava je podana v preg lednici 1. Končno emulzijo smo izdelali po tehnološkem postopku metode v enem koraku ali o ne-po t metode, v količini 1,5 kg . V posodo va- kuumskeg a homog enizatorja (Stephan UmC5; Stephan- machinery, Nemčija) smo dodali mandljevo olje, karitejevo maslo, g licerilstearat SE, g licerol, ksantan in predhodno pripravljen 2-odstotni vodni izvleček vodne kreše v primeru testne oz. demineralizirano vodo v primeru placebo emul- zije. Zmes v homog enizatorju smo med mešanjem na sred- njih obratih (1500 rpm/min) seg reli na 70 °C, da so se li- pofilne sestavine stalile, mešali 5 min pri največjih obratih (3000 rpm/min) ter nato ohladili na sobno temperaturo. Na koncu smo dodali vitamin E, eterično olje sivke in mle- čno kislino (do pH 5,5) ter ponovno homog enizirali 5 min. f izikalno stabilnost smo preverili s testom centrifug iranja (30 min, 3000 rpm), pri čemer ni smelo priti do razslojitve ali drug ih vidnih sprememb testirane emulzije. mikrobiološke kakovosti končne emulzije nismo ovrednotili, saj smo na podlag i rezultatov predhodnih protimikrobnih testiranj g li- cerilkaprilata (15) predpostavili, da bo za namene izvedbe 5 farm vestn 2023; 74 IZVIRNI ZNANSTVENI ČLANKI Testna emulzija (%, m/m) Placebo emulzija (%, m/m) mandljevo olje 10 10 Karitejevo maslo 5 5 glicerilstearat 1,3 1,3 glicerol 5 5 Ksantan 0,4 0,4 Vitamin E 1 1 glicerilkaprilat 0,5 0,5 2-odstotna (m/m) vodna raztopina izvlečka brazilske kreše 76,8 / Demineralizirana voda / 76,8 mlečna kislina q.s. Eterično olje sivke q.s. Preglednica 1: Sestava testne in placebo emulzije. Table 1: Composition of test and placebo emulsions. raziskave mikrobiološka stabilnost v dveh mesecih uporabe emulzije zadostna. Testno in placebo emulzijo smo napolnili v plastične vsebnike z volumnom 50 mL. 2.3 PROTOKOL RAZISKAVE IN VREDNOTENJE REZULTATOV Raziskava je bila zasnovana kot kontrolirana raziskava sen- zoričneg a vrednotenja s hedonsko metodo z efektivnim te- stiranjem testne in placebo emulzije, pri čemer so bili pro- stovoljci seznanjeni s tem, kateri izdelek je testna in kateri placebo emulzija. Dvojnoslepeg a načrta raziskave z izdela- nima emulzijama nismo mog li izvesti, saj je izvleček brazilske kreše testno emulzijo obarval rahlo rjavkasto. V raziskavo je bilo vključenih 20 prostovoljcev (4 moški in 16 žensk), starih od 33 do 55 let, ki so bili seznanjeni s sestavo in navodili za uporabo emulzij, prav tako s pravicami in dolžnostmi, ki jih imajo kot prostovoljci, ter so podpisali informirani pristanek. Prostovoljci med uporabo emulzij niso smeli uporabljati dru- g ih izdelkov za neg o obraza, menjati dovoljenih vsakodnev- nih kozmetičnih izdelkov (ličila, izdelki za čiščenje) ter obi- skovati tretmajev neg e obraza v kozmetičnem salonu. Dva meseca so si prostovoljci dvakrat dnevno (zjutraj in zvečer) na levo polovico obraza nanašali testno emulzijo z izvlečkom brazilske kreše, na desno polovico pa placebo emulzijo. Vsakemu prostovoljcu smo pred začetkom razi- skave, po enem mesecu ter po dveh mesecih testiranja fotog rafirali desno in levo polovico ter frontalni del obraza. Vrednotili smo g ube v predelu oči, in sicer na lateralnem periorbitalnem delu leveg a in desneg a očesa. Po končanem testiranju smo s pomočjo 68 neodvisnih ocenjevalcev, ki smo jih izbrali naključno in niso vedeli za praktično izvedbo raziskave, ovrednotili rezultate. Z opa- zovanjem fotog rafij prostovoljcev so ocenili, ali so se g ube v predelu oči po enem oz. po dveh mesecih spremenile. f otog rafije smo naključno podali v parih: začetno stanje in stanje po enem mesecu ter začetno stanje in stanje po dveh mesecih, za levo in za desno stran obraza. Ocenje- valci so morali določiti, na kateri od dveh fotog rafij prepo- znajo bolj izrazite g ube; primer je podan na sliki 2. Rezultate ocenjevalcev smo statistično obdelali s prog ramom Excel. Poleg opisaneg a neodvisneg a ocenjevanja smo učinek emulzije ovrednotili tudi preko samoocenitvenih vprašalni- kov po enem in dveh mesecih testiranja, kjer so prostovoljci podali lastno oceno o stanju vlažnosti, čvrstosti in g ladkosti kože ter g ub na levi in desni strani obraza z opisno petsto- penjsko lestvico (zelo izboljšano, izboljšano, brez spre- memb, poslabšano, zelo poslabšano). Prostovoljci so oce- nili tudi lasten tip kože, kjer so imeli podanih šest različnih možnosti (suha, mastna, mešana, občutljiva, normalna, zrela) ter ovrednotili učinkovitost emulzije (štiristopenjska lestvica; zelo zadovoljen, zadovoljen, nezadovoljen, zelo nezadovoljen), vonj emulzije (petstopenjska lestvica; zelo dober, dober, sprejemljiv, slab, zelo slab) in konsistenco emulzije (petstopenjska lestvica; zelo dobra, dobra, spre- jemljiva, slaba, zelo slaba). 3 r ezUl t at i Rezultati senzoričneg a vrednotenja vključujejo podatke 17 prostovoljcev (od 20, vključenih v raziskavo). Tri prostovoljke testiranja niso zaključile; dvema prostovoljkama emulzija ni ustrezala, eno prostovoljko pa smo izključili, saj emulzij deset dni ni uporabljala. Prostovoljci so v sklopu samoocenitveneg a vprašalnika po- dali lastno oceno o stanju vlažnosti, čvrstosti in g ladkosti kože ter g ub na levi in desni strani obraza po enem in po dveh mesecih uporabe emulzij. Navedli so tudi svoj tip kože 6 IZVLEČEK BRAZILSKE KREš E (ACmEl l A ol ERACEA) V POmLAJEVALNI KOZmETIKI: SENZORIČNO VREDNOTENJE TESTNE IN PLACEBO EmULZIJE farm vestn 2023; 74 Slika 2: Primer vrednotenja fotografij. Pod sliko je podano mnenje ocenjevalca, da so na levi sliki vidne večje gube. Figure 2: Example of photo evaluation. Below the image, the evaluator's opinion is given that larger wrinkles are visible on the left photo. ter se opredelili do splošnih lastnosti proučevanih emulzij. Tako je 24 % prostovoljcev ocenilo, da sta emulziji premalo mastni, večinoma tisti s suho kožo. Prostovoljcem z me- šano, normalno in mastno kožo sta emulziji ustrezali; 18 % jih je menilo, da se hitro vpijata v kožo, 71 % sta se zdeli ustrezno viskozni. Vonj je ustrezal 47 % prostovoljcev. Po dveh mesecih uporabe testne emulzije je 82 % prosto- voljcev ocenilo, da se jim je izboljšala hidratiranost kože, 65 % g ladkost kože, 59 % čvrstost kože in 35 % prosto- voljcev je opazilo zmanjšanje g ub (g raf 1). Pri placebo emulziji so bili deleži precej nižji, in sicer je 47 % prosto- voljcev menilo, da se je izboljšala hidratiranost kože, 24 % se je izboljšala g ladkost kože, 18 % se je izboljšala čvrstost in 12 % jih je opazilo zmanjšanje g ub (g raf 1). Statistična obdelava podatkov, pridobljenih s pomočjo zu- nanjih ocenjevalcev, je pokazala ug oden učinek emulzije z vg rajenim izvlečkom brazilske kreše na izrazitost g ub. Sta- nje g ub po enem mesecu je 65 % ocenjevalcev (p = 0,44) ocenilo kot boljše, po dveh mesecih pa 73 % ocenjevalcev (p = 0,15), toda rezultat ni bil statistično značilen. 4 disk Usij a Rezultati samoocenjevanja po dveh mesecih uporabe te- stne emulzije so pokazali pomembno izboljšanje vredno- tenih parametrov za testno emulzijo v primerjavi s placebo emulzijo. Za testno emulzijo je približno trikrat več prosto- voljcev navedlo izboljšanje g ladkosti in čvrstosti kože ter izrazitosti g ub kot za placebo emulzijo, izboljšanje hidrati- ranosti kože pa je opazilo približno dvakrat več prostovolj- cev. Poudariti moramo, da so prostovoljci vedeli, katera emulzija je testna in katera placebo, saj je bila testna emul- zija zaradi izvlečka brazilske kreše drug ačne barve. Dejavnik placeba je torej najverjetneje močno vplival na subjektivnost zaznavanja, kar je pričakovano (16). Ug odne rezultate subjektivneg a samoocenjevanja smo po- trdili v drug em delu raziskave, kjer smo večjo objektivnost vrednotenja sprememb stanja kože zag otovili z neodvisnim ocenjevanjem s pomočjo zunanjih ocenjevalcev. Ti so po- trdili izboljšanje stanja g ub v predelu oči, vendar statistična obdelava ni pokazala statistične značilnosti rezultata. Na podlag i rezultatov sklepamo, da je k videzu napete kože z manj izrazitimi g ubami ključno prispevala povečana hidra- tiranost, kar se sklada z rezultati Choi in sod., ki so ug otovili, da je premalo hidrirana koža videti bolj nag ubana (17). Statistično značilneg a učinka emulzije z vg rajenim izvleč- kom brazilske kreše na stanje g ub nismo uspeli dokazati, vendar bi to lahko bila tudi posledica omejitev raziskave, in sicer majhneg a števila prostovoljcev (17 od 20 jih je za- ključilo raziskavo), heterog enosti skupine prostovoljcev (ve- lik razpon starosti, od 33 do 55 let, večje število žensk kot moških), nenadzorovanih dejavnikov med fotog rafiranjem prostovoljcev (osvetljenost, sproščenost obraza) ter razlik v količini emulzije, ki so jo posamezni prostovoljci porabili med testiranjem, ki jih nismo beležili. Objavljene raziskave namreč dokazujejo značilne učinke iz- vlečka brazilske kreše na človeško in živalsko kožo. Savic 7 farm vestn 2023; 74 IZVIRNI ZNANSTVENI ČLANKI 0 % 10 % 20 % 30 % 40 % 50 % 60 % 70 % 80 % 90 % hidratiranost kože gladkost kože čvrstost kože zmanjšanje gub testna emulzija placebo emulzija Graf 1: Rezultati samoocenjevanja prostovoljcev testne in placebo emulzije po dveh mesecih uporabe. Graph 1: Self-assessment results of volunteers of test and placebo emulsion after two months of use. in sod. (11) so proučevali vpliv testne emulzije (seruma), ki je vsebovala 2 % vodno-propandiolneg a izvlečka brazilske kreše (z deklarirano vsebnostjo vsaj 50 mg /L spilantola v izvlečku). Učinke so vrednotili s silikonskimi odlitki periorbi- talnih in perioralnih reg ij obraza na osmih prostovoljcih. Pre- verjali so učinek seruma na g lobino g ub, nato pa so učinke seruma primerjali z učinki kontrolne emulzije (kreme), ki je prav tako vsebovala 2 % izvlečka brazilske kreše. Na eno stran obraza so prostovoljci nanašali serum, na drug o stran obraza pa kremo. Ug otovili so statistično značilno razliko med osnovnim stanjem kože in g lobino g ub po 14-dnevni uporabi seruma, statistične razlike med delovanjem seruma in kreme pa ni bilo. V raziskavi niso uporabili placeba. V še dveh raziskavah so proučevali vpliv izvlečka brazilske kreše na stanje kože, niso pa bile izvedene na človeški, temveč na podg anji koži. moro in sod. (18) so proučevali celjenje rane po dermalnem nanosu mazila z 20 % suheg a etanolneg a izvlečka brazilske kreše. Z mikroskopsko pre- iskavo tkiv in kvantificiranjem hidroksiprolina so ug otovili večjo količino in boljšo razporeditev kolag ena na ranjenih področjih, tretiranih s testnim mazilom, kot na področjih, tretiranih s placebo mazilom. Yamane in sod. (19) so prou- čevali učinke izvlečka brazilske kreše in eteričneg a olja ma- cele (Achyro cline satureio ides), vg rajenih v obliže za celjenje ran na podg anah. S proučevanjem slik kožnih lezij in tkiv povrhnjice, usnjice in podkožja so ug otovili, da so se rane celile hitreje, obnovljena povrhnjica je bila debelejša, kola- g en pa je bil v novem tkivu bolj enakomerno razporejen. Ker je podobno kot v primeru rane pri zreli koži povrhnjica tanjša in količina kolag ena zmanjšana, hkrati pa je kolag en neenakomerno razporejen (2), je smiselna povezava z ug odnimi učinki izvlečka brazilske kreše tudi pri zreli koži. Izvleček brazilske kreše je tudi predmet patenta US 7,531,193 B2, kjer g a g lede dermalnih učinkov primerjajo z učinki uporabe botoksa (20). V patentu je izpostavljen vpliv zmanjšanja g ub preko zaviranja kontraktilne aktivnosti v mišicah obraza, vendar neposredne raziskave o takem učinku spilantola ali izvlečka brazilske kreše niso na voljo. 5 sk l ep V okviru kozmetološke raziskave smo proučevali pomlaje- valno delovanje testne emulzije z izvlečkom brazilske kreše, og laševanim kot naravni botoks. Osredotočili smo se na vidne učinke zmanjšanja očesnih g ub v primerjavi s placebo emulzijo brez izvlečka. Rezultati samoocenjevanja prosto- voljcev so pokazali izboljšanje hidratiranosti, g ladkosti in čvrstosti kože ter izrazitosti g ub, ki je bilo bolj izraženo pri testni emulziji. Rezultati neodvisneg a ocenjevanja s po- močjo zunanjih ocenjevalcev so prav tako pokazali večje izboljšanje stanja g ub pri emulziji z izvlečkom, ki pa ni bilo statistično značilno. Na končne rezultate so lahko vplivale naslednje omejitve in pomanjkljivosti raziskave: nenadzorovani dejavniki med fotog rafiranjem prostovoljcev, kot sta osvetljenost in sproš- čenost obraza, razlike v količini emulzije, ki so jo posamezni prostovoljci porabili med testiranjem, heterog enost skupine in majhno število prostovoljcev. Kakovost raziskave bi lahko nadg radili z uporabo instru- mentalnih metod, kot so meritve hidratacije in reliefa kože, ki so za razliko od metodolog ije subjektivneg a ocenjevanja, na kateri je temeljila naša raziskava, znanstveno relevant- nejše. menimo pa, da je za načrtovanje tovrstnih kozme- toloških raziskav ključneg a pomena opredelitev končneg a cilja oz. namena. Če želimo primarno vrednotiti tiste koz- metične učinke, ki so pomembni z vidika končneg a upo- rabnika, sta osredotočenost na vizualno opazne učinke in izvedba hedonskeg a senzoričneg a vrednotenja z efektiv- nimi testi ustrezni izbiri. 6 zah val a Raziskovalno delo je bilo izvedeno v sklopu projekta mladi raziskovalci za razvoj šaleške doline. Avtorici se zahvaljujeva Katarini grazer, Evi Hudournik in Lari goršek za izvedbo laboratorijskeg a dela, fotog rafiranja prostovoljcev in zbiranja podatkov, mag . kem. teh. Karmen grabant za mentorsko delo ter prof. dr. Samu Kreftu za pomoč pri statistični ob- delavi podatkov. 7 l it er at Ur a 1. Khavkin J, Ellis DAF. Aging Skin: Histology, Physiology, and Pathology. Vol. 19, Facial Plastic Surgery Clinics of North America. Elsevier; 2011. p. 229–34. 2. Ganceviciene R, Liakou AI, Theodoridis A, Makrantonaki E, Zouboulis CC. Skin anti-aging strategies. Vol. 4, Dermato- Endocrinology. Taylor & Francis; 2012. p. 308. 8 IZVLEČEK BRAZILSKE KREš E (ACmEl l A ol ERACEA) V POmLAJEVALNI KOZmETIKI: SENZORIČNO VREDNOTENJE TESTNE IN PLACEBO EmULZIJE farm vestn 2023; 74 3. Stein R, Berger M, Santana de Cecco B, Mallmann LP , Terraciano PB, Driemeier D, et al. Chymase inhibition: A key factor in the anti-inflammatory activity of ethanolic extracts and spilanthol isolated from Acmella oleracea. J Ethnopharmacol. 2021 Apr 24;270. 4. Rahim RA, Jayusman PA, Muhammad N, Mohamed N, Lim V, Ahmad NH, et al. Potential antioxidant and anti-inflammatory effects of spilanthes acmella and its health beneficial effects: A review. Vol. 18, International Journal of Environmental Research and Public Health. MDPI AG; 2021. 5. Chakraborty A, Devi RKB, Rita S, Sharatchandra K, Singh TI. Preliminary studies on antiinflammatory and analgesic activities of Spilanthes acmella in experimental animal models. Indian J Pharmacol. 2004;36(3):148–50. 6. Wongsawatkul O, Prachayasittikul S, Isarankura-Na-Ayudhya C, Satayavivad J, Ruchirawat S, Prachayasittikul V. Vasorelaxant and antioxidant activities of spilanthes acmella Murr. Int J Mol Sci. 2008 Dec;9(12):2724–44. 7. Prachayasittikul S, Suphapong S, Worachartcheewan A, Lawung R, Ruchirawat S, Prachayasittikul V. Bioactive metabolites from Spilanthes acmella Murr. Molecules. 2009 Feb;14(2):850–67. 8. Ratnasooriya WD, Pieris KPP , Samaratunga U, Jayakody JRAC. Diuretic activity of Spilanthes acmella flowers in rats. J Ethnopharmacol. 2004 Apr;91(2–3):317–20. 9. Savadi R V., Yadav R, Yadav N. Study on immunomodulatory activity of ethanolic extract of Spilanthes acmella Murr. leaves. Indian J Nat Prod Resour. 2010;1(2):204–7. 10. Savic S, Petrovic S, Savic S, Cekic N. Identification and photostability of N-alkylamides from Acmella oleracea extract. J Pharm Biomed Anal. 2021 Feb 20;195:113819. 11. Savic SM, Cekic ND, Savic SR, Ilic TM, Savic SD. ‘All-natural’ anti-wrinkle emulsion serum with Acmella oleracea extract: A design of experiments (DoE) formulation approach, rheology and in vivo skin performance/efficacy evaluation. Int J Cosmet Sci. 2021 Oct 1;43(5):530–46. 12. Dallazen JL, Maria-Ferreira D, da Luz BB, Nascimento AM, Cipriani TR, de Souza LM, et al. Pharmacological potential of alkylamides from Acmella oleracea flowers and synthetic isobutylalkyl amide to treat inflammatory pain. Inflammopharmacology. 2020 Feb 1;28(1):175–86. 13. De Spiegeleer B, Boonen J, Malysheva S V., Mavungu JD Di, De Saeger S, Roche N, et al. Skin penetration enhancing properties of the plant N-alkylamide spilanthol. J Ethnopharmacol. 2013 Jun 21;148(1):117–25. 14. Boonen J, Baert B, Roche N, Burvenich C, De Spiegeleer B. Transdermal behaviour of the N-alkylamide spilanthol (affinin) from Spilanthes acmella (Compositae) extracts. J Ethnopharmacol. 2010 Jan 8;127(1):77–84. 15. Kočevar Glavač N, Lunder M. Preservative efficacy of selected antimicrobials of natural origin in a cosmetic emulsion. Int J Cosmet Sci. 2018 Jun 1;40(3):276–84. 16. Anderson S, Stebbins GT. Determinants of placebo effects. In: International Review of Neurobiology. Int Rev Neurobiol; 2020. p. 27–47. 17. Choi JW, Kwon SH, Huh CH, Park KC, Youn SW. The influences of skin visco-elasticity, hydration level and aging on the formation of wrinkles: A comprehensive and objective approach. Ski Res Technol. 2013 Feb;19(1). 18. Moro SD de S, de Oliveira Fujii L, Teodoro LFR, Frauz K, Mazoni AF, Esquisatto MAM, et al. Acmella oleracea extract increases collagen content and organization in partially transected tendons. Microsc Res Tech. 2021 Nov 1;84(11):2588–97. 19. Yamane LT, De Paula E, Jorge MP , De Freitas-Blanco VS, Junior ÍM, Figueira GM, et al. Acmella oleracea and Achyrocline satureioides as Sources of Natural Products in Topical Wound Care. Evidence-based Complement Altern Med. 2016;2016. 20. Dermane F, Passaro G. Use of an Acmella oleracea extract for the botulinum toxin-like effect thereof in an anti-wrinkle cosmetic composition. Vol. 2, Google Patents. 2009. p. 1–6. 9 farm vestn 2023; 74 IZVIRNI ZNANSTVENI ČLANKI